本发明公开了一种新型耐葡萄糖的β‑葡萄糖苷酶基因及其应用,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了所述新型耐葡萄糖的β‑葡萄糖苷酶基因的制备方法以及含有所述新型耐葡萄糖的β‑葡萄糖苷酶基因的重组质粒pET32a‑Bgl2238,本发明还公开了一种重组β‑葡萄糖苷酶及其制备方法,将所述重组β‑葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌原核表达系统中过量表达,重组β‑葡萄糖苷酶在大肠杆菌表达体系中高效可溶性表达。本发明还公开了重组β‑葡萄糖苷酶对虎杖中白藜芦醇苷的水解应用,说明了采用所述方法得到的重组β‑葡萄糖苷酶,具有较高的催化活性和耐葡萄糖活性,有很大的工业化生产和应用前景。
本发明涉及一种β‑葡萄糖苷酶及其在制备葡萄糖和昆布寡糖中的应用。所述β‑葡萄糖苷酶氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的β‑葡萄糖苷酶为结构与功能新颖的同时具有葡聚糖酶和转糖苷酶活性的水解酶,其氨基酸序列与已有性质报道的β‑葡萄糖苷酶序列相似度仅为78.96%,是一个新酶。本发明所述的β‑葡萄糖苷酶产量可达406.1U/mL,最适反应温度为40℃,最适反应PH为6。本发明所述的β‑葡萄糖苷酶可以同时表现出针对β‑葡聚糖的葡聚糖酶活性生产葡萄糖和针对昆布多糖的转糖苷酶活性生产昆布寡糖。